企业等级: | 普通会员 |
经营模式: | 生产加工 |
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发布时间:2021-11-07 04:11:00 作者:陶迈森科学仪器
注意事项:从原理上讲,所有菌都可用瓷珠菌保存管保存。菌保存的原理是DNA-copy时自发突变导致菌退化,因此要创造代谢不活泼的状态,干燥、低温、缺氧、缺营养的环境,创造的环境越接近此状态,所保存的菌的时间就越长。但需要注意的是,由于苛刻菌(如流行感嗜血杆l菌、脑l膜炎萘瑟氏菌)等特殊细菌保存时,需-80℃或更低温度保存,才可以做到更长期的保存。
我们现提供的冻存管,为第二代菌之种。菌之种传代前应准备好适于该菌之种生长的液体、固体培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。取一支冻存管于室温下自然解冻,取适量接种于液体培养基,或划线接种于固体培养基中按规定培养、传代。注意:已经解冻的冻存管应在24 小时内使用,不能再冷冻保存,以免冻融!
应用领域——生物学方向细胞冻存技术是生物学保存物种的重要手段。在环境遭到未有过的破坏动物、植被随时可能面临灭l绝危险的今天,更是尤为关键,虽然不是治本的方法,但至少可以尽可能的留下那些曾经存在的生命痕迹。
发展历史:1. 1776年, Spallanzani尤早发表了“冷”处理对“细胞”生命活动影响的报道。2.十九世纪中后叶,许多早期的工作者(Prevost, 1840; de Quatrefages, 1853; Mantegazza, 1866; Scheuk, 1870) 重复研究了低温处理对精l子活动的影响,得出了和SpalLanzani相似的结论。即“冷不能杀l死精l子”。
(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4C冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时(此步可省略),再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,之后沉入液氮中。
分布降温法:细胞系冻存程序:1)单层细胞的消化。将经24~48小时培养已长成单层的传代细胞培养物弃去生长液,加适量ATV,1~2分钟后倒弃ATV,再加入少量ATV液,经0.5~1分钟倒去ATV,室温或37oC温箱作用2~3分钟,视细胞解离情况,拍打细胞培养瓶。使单层细胞完全解离。SP2/0瘤细胞,待生长好后用吸管吹打,再经1000转1分离心10分钟。
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