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结果显示:荧光显微镜所观察到的图象,主要以两个指标判断结果,一个是形态学特征;另一个是荧光的亮度,在结果的判定中,必须将二者结合起来,综合判定。荧光强度的表示方法如下:+十+ ~ ++++:荧光闪亮,呈明显的亮绿色。++ :荧光明亮,呈黄绿色。+ :荧光较弱,但清楚可见。土:极弱的疑荧光。一:无荧光。
先在可见光源下找到具有细胞分裂相的视野,然后打开荧光激发光源, FITC的激发波长为490nm。细胞被PI染成红色,而经FITC标记的探针的探针所在位置发出绿色荧光。由于本实验使用的是Y染色体上的特序列,因此在男性外周血染色体标本的杂交中呈阳性,即使在末分裂的细胞中,也可以观察到明显的杂交信号。
制片:选无自发性荧光的石英玻片或普通好的玻片,洗净后浸泡于无永乙醇和乙mi等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。
固定:除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。固定的作用有三:①防止标本从玻片上脱落;②除去防碍抗原抗ti结合的类脂,使抗原抗ti结合物易于获得良好的染色结果;③固定的标本易于保存,如组织切片固定后在20°C下可保存一年而不改变其染色特性。
加之,它们内部并非是均匀物质,一般可分为结晶和非结晶二部分,玻片染色缸供应,同时还有一定数量的填充剂(TiO,),所以不同品种聚酰胺的染色性就有差异,但它们固有的优良染色性也是任何合成材料所望尘莫及的。从聚酰胺分子结构上看,在大分子上含有相当数量的亚( CH,-)疏水链,因而可应用分散染料染色,其机理是依靠末端氨基和酰胺基对染料发生氢键和范德华力结合,因此上染率不受聚酰胺末端氨基的限制,加之,染色时槊浴的pH值适应范围较广,所以分散染料对聚酰胺有良好的覆盖性。再从大分子末端含有氨基(-NH,)和羧基(-CO0H-)看,还有类似羊毛的染色性质,可应用阴离子染料(酸性、直接、活性等染料)染色。强酸性染料染聚酰胺主要依靠它的末端氨基和染料阴离子结。